Laser Confocal Microscope Nta thiab daim ntawv thov
Thaum nyob rau hauv ib lub microscope ib txwm duab dav hlau ntawm kev soj ntsuam yog cais los ntawm cov nyob sib ze axial dav hlau los ntawm overlapping lub focal dav hlau ntawm lub hom phiaj lens nrog lub detector, nyob rau hauv ib tug confocal microscope qhov kev rho tawm yog tiav los ntawm illuminating tus qauv nrog ib tug diffraction-limited point ntawm lub teeb thiab filtering stray lub teeb los ntawm kev siv ib tug pinhole nyob rau hauv txoj kev ntawm kev sau lub teeb nyob rau hauv lub conjugate tsom xam ntawm no taw tes ntawm lub teeb kom ua tiav qhov kev sib cais thiab yog li txhim kho kev daws teeb meem.
Tsuas yog lub teeb pom kev rov qab los ntawm cov txheej txheem conjugate tuaj yeem dhau los ntawm tus pinhole hauv txoj kev sib sau lub teeb, thaum cov seem ntawm cov qauv txheej tsis cuam tshuam txog kev cuam tshuam los ntawm tus pinhole. Qhov no muab qhov kev daws teeb meem loj dua. Qhia hauv qab no yog qhov sib piv ntawm ib sab ntawm cov fluorescence microscopy thiab confocal microscopy ntawm tib cov qauv tuab. Thaum cov dluab raug coj los ntawm cov dav hlau focal sib txawv, cov duab feem ntau hu ua "z-pawg" yog tsim, uas qhia tau hais tias qhov kev daws teeb meem thiab qhov sib txawv tau muab los ntawm confocal microscopy thiab cov laj thawj hauv qab no rau cov txiaj ntsig no. Nws tuaj yeem pom tau tias kev tshuaj xyuas cov duab nyob rau sab saum toj ntawm pawg uas lub dav hlau imaging nyob saum cov ntaub so ntswg nthuav tawm ntau lub teeb tawg nyob rau hauv cov duab fluorescence, whereas confocal microscope duab tshwm dub. Qhov kev txo qis hauv PSF hauv qhov kev taw qhia axial ncaj qha ua rau qhov sib txawv ntawm kev daws teeb meem pom ntawm qhov muag pom hauv nruab nrab ntawm z-pawg.
Optical slice scanning duab
Lwm feature ntawm laser scanning confocal microscopy yog tias nws yog ib tug txheej txheem scanning. Cov txheej txheem kev teeb pom kev dav dav dav dav teeb pom kev zoo rau tag nrho cov qauv kom cov duab tuaj yeem ntes ncaj qha los ntawm qhov muag liab qab lossis lub ntsuas ntsuas, tab sis LSCM siv ib lossis ntau lub teeb tsom teeb ntawm lub teeb los luam theej duab los ntawm cov qauv, kom cov duab tshwm sim hu ua optical hlais, raws li qhia hauv daim duab hauv qab no. Qhov txawv ntawm ib txwm siv dav-teeb pom kev zoo thiab laser scanning confocal illumination yog qhia hauv qab no.
Yog li ntawd, ib txoj hauv kev ntawm niaj hnub confocal microscopy yog qhia nyob rau hauv daim duab hauv qab no. Lub teeb excitation ntawm lub laser yog dhau los ntawm ib daim iav dichroic thiab luam tawm los ntawm ib khub ntawm galvanometer tsom iav nyob rau hauv x-kev taw qhia thiab y-kev taw qhia ntawm tus qauv, thiab lub excitation (los yog xav txog) ntawm tus qauv dhau los ntawm ib tug pinhole rau hauv lub PMT. tus ntes yuav tsum tau kaw, thiab cov duab scanned yog reconstructed los ntawm lub computer los tsim ib tug tiag tiag duab ntawm cov qauv.
