Basic Principles of Confocal Laser Microscopy
Lub hauv paus ntawm confocal laser microscopy yog nyob rau hauv "confocal" technology. Cov thev naus laus zis no siv lub teeb pom kev zoo (feem ntau yog laser) thiab qhov tshwj xeeb kho qhov muag, yog li ntawd tsuas yog cov qauv ntawm lub focal point yog illuminated thiab imaged thaum lub sij hawm imaging txheej txheem, thaum cov cheeb tsam sab nraum lub focal point yog ignored. Qhov kev xaiv illumination thiab nrhiav kom pom txoj kev no ua rau txhim kho qhov kev daws teeb meem thiab qhov sib txawv ntawm cov duab.
1. Lub teeb qhov chaw
Confocal microscopes siv lasers ua lub teeb pom kev zoo vim lasers muaj siab monochromaticity, coherence, thiab directionality. Cov yam ntxwv no ua rau cov lasers muab cov teeb pom kev ruaj khov thiab kev tswj hwm ntawm cov nqaj tsom.
2. Teeb pom kev zoo
Lub teeb pom kev zoo muaj xws li laser thiab scanning ntaus ntawv. Lub laser beam sai sai txav los ntawm ib tug scanning ntaus ntawv (feem ntau yog ib tug galvanometer) mus cuag point los ntawm point scanning ntawm tus qauv. Cov txheej txheem scanning no tso cai rau lub laser beam los tsim cov ntsiab lus focal ntawm cov qauv, yog li ua tiav txheej los ntawm txheej txheej duab ntawm cov qauv.
3. Confocal aperture
Muaj ib qho confocal aperture ntawm lub hom phiaj lens ntawm lub tshuab tsom iav thiab cov qauv. Lub luag haujlwm ntawm qhov aperture no yog txhawm rau txo qhov tob ntawm cov duab, thiab tsuas yog lub teeb dhau los ntawm qhov aperture tuaj yeem tau txais los ntawm tus ntes. Nyob rau hauv txoj kev no, tsuas yog lub teeb ntawm qhov chaw focal tuaj yeem nkag mus rau hauv lub ntes, thaum lub teeb sab nraud ntawm lub focal point raug thaiv.
4. Lub hom phiaj lens
Lub hom phiaj lo ntsiab muag yog ib qho tseem ceeb hauv confocal microscopy, lub luag hauj lwm rau tsom lub laser mus rau tus qauv thiab sau lub teeb pom kev los yog emission rov qab los ntawm cov qauv. Lub hom phiaj zoo lo ntsiab muag tuaj yeem muab cov duab daws teeb meem siab.
5. Ntes
Lub detector yog lub luag hauj lwm rau tau txais lub teeb dhau los ntawm confocal aperture thiab hloov mus rau hauv hluav taws xob teeb liab. Cov teeb liab hluav taws xob no tau ua tiav los tsim cov duab.
6. Cov duab ua
Cov ntaub ntawv nyoos tsim los ntawm confocal microscopy yog cov duab ob sab uas yuav tsum tau ua tiav los ntawm lub khoos phis tawj software kom rov tsim cov duab peb sab. Cov txheej txheem no suav nrog cov duab overlay, txhim kho, thiab 3D reconstruction.
