Nkag siab txog confocal fluorescence microscopy
Lub hauv paus ntsiab lus ntawm confocal fluorescence microscopy: Siv lub teeb pom kev zoo los ua kom pom cov qauv tsim kom muaj lub teeb me me, zoo-txhais chaw ntawm lub dav hlau focal. Cov fluorescence emitted los ntawm qhov chaw tom qab illuminated yog sau los ntawm lub hom phiaj lens thiab xa rov qab mus rau lub dichroic daim iav raws li tus thawj illumination txoj kev. ua ib tug beam splitter. Lub spectrometer xa cov fluorescence ncaj qha mus rau lub ntes. Muaj ib lub pinhole nyob rau hauv pem hauv ntej ntawm lub teeb qhov chaw thiab lub detector, uas yog hu ua lub illumination pinhole thiab nrhiav pom pinhole feem. Qhov ntev geometric ntawm ob qhov sib xws, txog 100-200nm; txheeb ze rau lub teeb taw tes ntawm lub dav hlau focal, ob yog conjugate, uas yog, lub teeb taw tes kis tau los ntawm ib tug series ntawm lo ntsiab muag thiab yuav kawg tau teem rau lub illumination pinhole thiab nrhiav pom pinhole tib lub sij hawm. Nyob rau hauv txoj kev no, lub teeb los ntawm lub dav hlau focal tuaj yeem ua kom pom tseeb hauv qhov ntau ntawm qhov nrhiav pom, thaum lub teeb tawg los ntawm saum toj lossis hauv qab ntawm lub dav hlau focal raug thaiv sab nraum lub qhov nrhiav pom thiab tsis tuaj yeem pom. Cov qauv yog scanned taw tes los ntawm taw tes nrog lub laser, thiab lub photomultiplier raj tom qab lub pinhole nrhiav tau cov duab confocal ntawm cov coj lub teeb taw tes taw tes taw tes, uas yog hloov dua siab tshiab rau hauv ib tug digital teeb liab thiab xa mus rau lub computer, thiab thaum kawg aggregated rau. qhov screen rau hauv daim duab meej confocal ntawm tag nrho cov dav hlau focal. .
Txhua daim duab focal dav hlau yog qhov ua tau ib qho kev kho qhov muag hla ntawm cov qauv. Qhov no optical cross-section yeej ib txwm muaj ib tug tej thickness thiab tseem hu ua ib tug optical nyias seem. Txij li thaum lub teeb pom kev zoo ntawm lub teeb pom kev yog ntau dua qhov siv lub teeb ntawm qhov tsis pom, thiab lub teeb tsis pom kev dav hlau yog lim los ntawm lub pinhole, qhov tob ntawm thaj tsam ntawm confocal system yog kwv yees li xoom. Kev soj ntsuam raws Z-axis kev taw qhia tuaj yeem paub qhov kho qhov muag tomography, tsim qhov xav tau Saib xyuas ob sab ntawm qhov muag pom ntawm qhov chaw tsom ntawm cov qauv. Los ntawm kev sib txuas XY dav hlau (focal dav hlau) scanning nrog Z-axis (optical axis) scanning, los ntawm kev sib sau ua ke ntawm cov duab ob sab thiab ua tiav nrog cov software tshwj xeeb hauv computer, cov duab peb sab ntawm cov qauv tuaj yeem tau txais.
Ntawd yog, qhov kev tshawb pom tus pinhole thiab lub teeb pom kev pinhole yog ib txwm tsom mus rau tib lub ntsiab lus, kom cov fluorescence zoo siab rau sab nraum lub dav hlau tsom tsis tuaj yeem nkag mus rau qhov pom tus pinhole.
Lub ntsiab lus yooj yim ntawm kev ua haujlwm ntawm laser confocal yog tias nws siv laser ua lub teeb ci. Raws li ib txwm muaj fluorescence microscope imaging, ib tug laser scanning ntaus ntawv thiab ib tug conjugate focusing ntaus ntawv yog ntxiv, thiab lub system yog tswj los ntawm lub computer mus sau thiab ua cov duab digital.
