Cov Ntsiab Cai ntawm Confocal Microscopy
Confocal microscope yog cov cuab yeej ntsuas ntsuas siab uas tau tshwm sim thiab tsim nyob rau xyoo 1980s, thiab yog ib qho tseem ceeb ntawm kev tshawb fawb cov cuab yeej rau kev kawm cov qauv submicron. Nrog rau txoj kev loj hlob ntawm cov computers, cov duab ua software thiab lasers, confocal microscopes kuj undergone zoo kev loj hlob, thiab tam sim no tau lug siv nyob rau hauv lub teb ntawm biology, microsystems thiab cov khoom ntsuas. Confocal microscope yog ib hom tshiab ntawm lub tshuab tsom xam ua ke nrog lub hauv paus ntsiab lus confocal, scanning technology thiab computer graphics ua technology. Nws cov txiaj ntsig tseem ceeb yog: kev daws teeb meem siab sab nraud thiab siab axial daws teeb meem, thiab kev tiv thaiv zoo ntawm lub teeb tsis pom kev, nrog qhov sib txawv siab.
Ib qho kev teeb tsa confocal microscope yog tso ob qhov me me rau ntawm lub dav hlau conjugate ntawm lub dav hlau focal ntawm cov khoom ntsuas, ib qho yog muab tso rau pem hauv ntej ntawm lub teeb qhov chaw thiab lwm qhov yog muab tso rau pem hauv ntej ntawm lub ntes, raws li qhia hauv daim duab. 1. Nws tuaj yeem pom los ntawm daim duab uas thaum lub ntsuas ntsuas yog nyob rau hauv lub dav hlau quasi-focus, lub teeb siv tau los ntawm qhov kev tshawb nrhiav kawg yog qhov loj tshaj plaws; Thaum cov qauv ntsuas nyob rau hauv qhov chaw tsis pom kev, lub teeb qhov chaw ntawm qhov kev tshawb pom qhov kawg diffuses thiab lub teeb siv zog txo qis sai. Yog li ntawd, tsuas yog lub teeb tso tawm los ntawm cov ntsiab lus ntawm lub dav hlau focal tuaj yeem dhau los ntawm qhov tawm ntawm qhov pinhole, thaum lub teeb tawm los ntawm cov ntsiab lus sab nraud ntawm lub dav hlau focal yog defocused rau ntawm qhov tawm pinhole dav hlau, thiab feem ntau ntawm lawv tsis tuaj yeem dhau los ntawm lub hauv paus pinhole. Yog li ntawd, qhov kev soj ntsuam lub hom phiaj ntawm lub dav hlau focal zoo nkaus li ci, thiab qhov tsis pom qhov pom tshwm dub li keeb kwm yav dhau, nce qhov sib piv thiab tshem tawm cov duab. Thaum lub sij hawm imaging txheej txheem, ob lub pinholes yog confocal, lub confocal point yog qhov kuaj pom, thiab lub dav hlau qhov chaw uas pom tau yog nyob rau hauv confocal dav hlau.
Qhov luaj li cas ntawm tus pinhole ntawm tus ntes hauv confocal microscopy plays lub luag haujlwm tseem ceeb. Nws cuam tshuam ncaj qha rau qhov kev daws teeb meem thiab teeb liab-rau- suab nrov piv ntawm lub kaw lus. Yog hais tias lub pinhole loj dhau lawm, cov nyhuv confocal nrhiav pom yuav tsis ua tiav, uas tsis tsuas yog txo qhov kev daws teeb meem ntawm lub kaw lus, tab sis kuj qhia ntau lub teeb pom kev; yog tias lub pinhole me dhau lawm, nws yuav txo qhov kev tshawb pom thiab txo cov duab microscopic. qhov kaj. Cov kev tshawb fawb tau pom tias thaum txoj kab uas hla ntawm lub pinhole yog sib npaug ntawm txoj kab uas hla ntawm Airy disk, qhov kev xav tau ntawm confocal tau ntsib, thiab qhov kev tshawb pom kev ua haujlwm tsis tau txo qis. Txij li txoj kab uas hla ntawm lub pinhole feem ntau yog nyob ntawm qhov kev txiav txim ntawm microns, yog tias muaj qhov sib txawv ntawm qhov taw tes ntawm lub laser beam thiab txoj hauj lwm ntawm lub pinhole, teeb liab distortion yuav tshwm sim. Yog li ntawd, confocal microscopes feem ntau siv lub tshuab autofocus, uas yuav ua rau kom lub sij hawm ntsuas.
Txij li thaum lub laser confocal scanning microscope yog ib qho kev ntsuas taw tes, txhawm rau kom tau txais cov duab ob sab ntawm cov khoom, nws yog ib qho tsim nyog yuav tsum tau siv ob-dimensional scanning hauv x thiab y cov lus qhia. Cov tshuab microscopes sib txawv siv cov txheej txheem scanning sib txawv:
(1) Object scanning. Ntawd yog, cov khoom nws tus kheej txav raws li txoj cai lij choj, thaum lub teeb lub teeb tseem tsis hloov pauv. Qhov zoo: ruaj khov kho qhov muag; Disadvantages: ib tug loj scanning rooj yuav tsum, yog li ntawd lub scan ceev yog heev txwv.
(2) Lub beam scanning system yog tsim los ntawm kev siv lub reflective galvanometer. Ntawd yog, los ntawm kev tswj lub scanning galvanometer, lub teeb tsom teeb pom kev zoo tsis tu ncua mus rau ib txheej ntawm cov khoom kom ua tiav ob-dimensional scanning. Nws qhov zoo dua yog tias nws muaj qhov siab precision thiab feem ntau siv rau kev ntsuas siab. Scanning ceev tau zoo dua li cov khoom scanning, tab sis nws tseem tsis ceev.
(3) Siv cov khoom siv acousto-optic deflection rau kev tshuaj ntsuam, thiab kev soj ntsuam tau pom tau los ntawm kev hloov cov zis zaus ntawm lub suab nthwv dej thiab tom qab ntawd hloov cov kev taw qhia kis ntawm lub teeb yoj. Nws qhov txiaj ntsig zoo tshaj plaws yog qhov scanning ceev heev. Lub tshuab scanning tsim los ntawm Tebchaws Meskas siv lub acousto-optic deflector los tsim cov duab yees duab tiag tiag. Nws tsuas yog siv sijhawm 1/30s los luam theej duab ob sab, thiab nws yuav luag ua tiav cov txiaj ntsig ntawm lub sijhawm.
(4) Nipkow disk scanning. Cov txheej txheem scanning tiav los ntawm kev tig lub Nipkow disk thaum khaws lwm cov khoom tseem ceeb. Nws tuaj yeem ua duab rau ib zaug thiab qhov nrawm nrawm heev. Txawm li cas los xij, txij li lub teeb pom kev yog tawm ntawm lub teeb, lub teeb tawm ntawm lub lens yuav tsum raug kho, thiab kev siv lub teeb lub zog tsawg heev.
