Taw qhia rau qee qhov kev paub txog optical microscope
Ib qho cuab yeej lossis cov cuab yeej uas nthuav tawm ib qho khoom me me los yog ib feem me me ntawm ib qho khoom ntawm qhov loj loj rau kev soj ntsuam. Nws yog dav siv nyob rau hauv industrial thiab ua liaj ua teb ntau lawm thiab kev tshawb fawb. Cov kws kho tsiaj thiab cov neeg ua haujlwm kho mob kuj siv lub tshuab tsom iav ntau hauv lawv cov lag luam. Dav faib ua optical microscopes thiab electron microscopes.
Optical microscope yog lub tshuab tsom iav uas siv lub teeb pom kev zoo li lub teeb ci. Ordinary optical microscopes tuaj yeem muab faib ua ob ntu: lub tshuab kho qhov muag thiab cov cuab yeej siv tshuab. Optical system feem ntau suav nrog eyepieces, lub hom phiaj lo ntsiab muag, condensers, diaphragms thiab lub teeb qhov chaw. Cov cuab yeej siv tshuab feem ntau suav nrog lub lens chim, daim iav kem, theem, daim iav puag, thickness hloov ntsia hlau thiab lwm qhov chaw (Daim duab 1). Nws lub hauv paus ntsiab lus kho qhov muag tau pom nyob rau hauv daim duab 2. Lub lens me me ntawm sab laug hauv daim duab sawv cev rau ib pawg ntawm cov lo ntsiab muag nrog luv focal ntev, hu ua lub hom phiaj lens. Lub lens convex loj ntawm sab xis sawv cev rau ib pawg ntawm cov lo ntsiab muag uas muaj qhov ntev focal ntev, hu ua eyepiece. Cov khoom yuav tsum tau soj ntsuam (AB) yog muab tso rau me ntsis sab nraum lub focal point (f1) ntawm lub hom phiaj lens. Lub teeb los ntawm cov khoom tsim ib qho inverted magnified tiag tiag duab (B'A') me ntsis hauv lub eyepiece tsom (f2) tom qab dhau los ntawm lub hom phiaj lens. Tus neeg saib xyuas lub qhov muag ntxiv kom pom cov duab tiag tiag (B'A') rau hauv ib qho duab inverted virtual (B"A") los ntawm lub qhov muag.
Lub eyepiece yog nyob rau saum lub microscope chim thiab feem ntau muaj ob convex lo ntsiab muag. Ntxiv rau kev nthuav dav ntxiv rau cov duab tiag tiag tsim los ntawm lub hom phiaj lens, nws kuj txwv qhov kev pom ntawm qhov muag pom. Raws li kev nthuav dav, muaj peb hom kev siv eyepieces: 5 zaug, 10 zaug thiab 15 zaug.
Lub hom phiaj lo ntsiab muag feem ntau nyob hauv qab lub microscope chim, ze rau qhov khoom tau pom. Nws muaj 8 mus rau 10 lo ntsiab muag. Nws txoj haujlwm yog kom loj (tsim kom pom cov duab tiag tiag rau cov khoom), qhov thib ob yog los xyuas kom meej cov duab zoo, thiab qhov thib peb yog txhawm rau txhim kho qhov kev daws teeb meem. Feem ntau siv lub hom phiaj lo ntsiab muag tuaj yeem muab faib ua qhov loj me (4 ×), nruab nrab magnification (10 × lossis 20 ×), siab magnification (40 ×) thiab roj immersion lub hom phiaj lens (100 ×) raws li qhov loj. Ntau lub hom phiaj lo ntsiab muag tau teeb tsa rau ntawm daim iav hloov lub log, thiab lub hom phiaj lens nrog ntau qhov sib txawv tuaj yeem xaiv los ntawm kev tig lub turntable raws li xav tau.
Qhov kev nthuav dav ntawm lub tshuab tsom iav yog qhov ntau ntawm lub qhov muag sib npaug los ntawm lub hom phiaj. Piv txwv li, yog hais tias lub qhov muag yog 10 lub sij hawm thiab lub hom phiaj lens yog 40 lub sij hawm, qhov magnification yog 40 × 10 zaug (magnification 400 zaug). Lub microscope zoo tuaj yeem nthuav 2000 zaug thiab paub qhov txawv ntawm ob lub ntsiab lus 1 × 10-5cm sib nrug.
Thaum lub teeb dawb dhau los ntawm lub lens convex, lub teeb nrog luv wavelength (xiav-ntsuab) muaj qhov cuam tshuam ntau dua li lub teeb nrog ntev wavelength (liab-txiv kab ntxwv). Yog li ntawd, thaum imaging, muaj ntau yam spectrums nyob ib ncig ntawm daim duab, thiab muaj ib lub voj voog ntawm xiav los yog liab teeb. Cov xim no yog hu ua chromatic aberration. Vim yog qhov sib txawv ntawm cov ces kaum uas lub teeb nkag mus (thiab tawm) ntau qhov chaw ntawm lub lens nto, lub teeb dhau los ntawm qhov chaw ntawm lub lens yog refracted ntawm lub kaum sab xis loj dua lub teeb dhau ntawm qhov nruab nrab ntawm lub lens. Yog li ntawd, cov duab tsis pom tseeb thiab tsis pom kev tshwm sim nyob ib ncig ntawm daim duab ncig thaum lub sijhawm ua duab. Qhov no tsis xws luag ntawm imaging nto curvature yog hu ua spherical aberration. Ib pawg ntawm convex thiab concave lens pawg nrog cov duab sib txawv, cov qauv thiab kev ncua kev koom tes nrog ib leeg los kho chromatic aberration thiab spherical aberration mus rau qhov loj tshaj plaws, tsim cov duab ci, meej thiab meej. Qhov no yog vim li cas lub eyepiece los yog lub hom phiaj lens yog tsim los ntawm ib txheej ntawm lo ntsiab muag feem. Xws li lo ntsiab muag yog hu ua plan achromats.
Thaum lub teeb pom kev los ntawm ib qho nruab nrab (xws li huab cua) mus rau lwm qhov nruab nrab denser (xws li iav), nws yuav khoov mus rau "ib txwm kab" (ib kab perpendicular rau qhov nruab nrab ntawm qhov nruab nrab), xws li BOA kab hauv daim duab. 3. Thaum lub teeb nkag los ntawm qhov nruab nrab ntom ntom (iav) rau hauv qhov nruab nrab tsis ntom ntom (cua), nws yuav deviate los ntawm "ib txwm kab", xws li AOB kab (Daim duab 3a). Thaum lub teeb dhau los ntawm lub khob condenser (refractive index 1.51) thiab nkag mus rau hauv huab cua, nws tseem yuav deviate thiab refract sab nraud, yog li lub teeb nkag mus rau lub hom phiaj lens yog txo qis, thiab qhov kev daws teeb meem ntawm daim duab kuj tseem txo. Thaum siv 100x lub hom phiaj lens, yog tias cov roj tau ntim ntawm lub hom phiaj lens thiab cov iav npog (qhov ntsuas qhov ntsuas tsis zoo kuj yog 1.51) kom cais cov huab cua, lub teeb tuaj yeem nkag mus rau lub hom phiaj lens yuav luag tsis muaj qhov cuam tshuam, uas ua rau kom qhov ci thiab kev daws teeb meem. daim duab. Cov hom phiaj zoo li no yog hu ua roj immersion hom phiaj (Daim duab 3b).
Lub condenser yog nyob rau hauv lub microscope theem, uas muaj peev xwm converge lub teeb los ntawm qhov chaw ntawm lub teeb, mloog zoo rau lub teeb ntawm cov qauv, thiab ua rau cov specimen tusyees irradiated nrog nruab nrab lub teeb siv. Qhov qis kawg ntawm lub condenser yog nruab nrog lub aperture nres (diaphragm) los tswj lub thickness ntawm beam.
Lub illumination qhov chaw ntawm qhov zoo tib yam optical microscope yog nyob rau hauv lub condenser, uas yog ib tug tshwj xeeb muaj zog teeb pom kev zoo nrog uniform illumination, thiab yog txawm peem rau nrog ib tug sib txawv resistor los hloov qhov siv ntawm lub teeb.
Txij li thaum lub teeb pom kev zoo ntawm lub teeb pom kev zoo tib yam kis tau los ntawm lub hauv qab ntawm lub lens lub cev, dhau los ntawm lub condenser lens, lub hom phiaj lens, thiab ncav cuag lub eyepiece, cov qauv yuav tsum tau soj ntsuam yuav tsum tau txiav mus rau hauv nyias slices nrog ib tug tuab ntawm txog. 6 μm uas tuaj yeem xa cov teeb pom kev hauv kev kho mob thiab tshuaj lom neeg. Thiab kom stain kom pom cov ntaub so ntswg sib txawv thiab cov hlwb thiab lwm cov qauv zoo. Cov txheej txheem ua tiav tag nrho yog hu ua cov txheej txheem cov ntaub so ntswg, suav nrog xaiv cov ntaub so ntswg tsim nyog, kho lawv nrog formaldehyde (formalin) tov, dehydrating nrog cawv ib kauj ruam, embedding nyob rau hauv paraffin, txiav cov ntaub so ntswg rau nyias slices nrog ib tug microtome thiab mounting lawv. ntawm iav slides, thiab tom qab staining nrog hematoxylin-eosin dye, cov ntaub so ntswg slides thaum kawg mounted nyob rau hauv optical resin kua nplaum. Npaj cov ntaub so ntswg tuaj yeem khaws cia rau lub sijhawm ntev.
Lub qhov muag thiab lub hom phiaj ntawm lub tshuab tsom iav tau teeb tsa ntawm ob qho kawg ntawm lub lens chim, thiab lawv qhov kev ncua deb yog tsau. Muab cov ntaub so ntswg swb rau ntawm theem, thiab tig lub hau hloov kho kom nruj kom coj cov theem ze rau lub hom phiaj lens. Cov ntaub so ntswg nkag mus rau hauv lub dav hlau focal ntawm lub hom phiaj lens, thiab cov duab ntawm cov ntaub so ntswg tuaj yeem pom hauv qhov muag. Tom qab ntawd siv cov ntsia hlau kho kom zoo los ua kom cov duab hauv lub qhov muag kom pom tseeb. Thaum hloov qhov magnification, lub eyepiece los yog lub hom phiaj lens yuav tsum tau hloov.






