Txhim kho qhov zoo ntawm Laser Scanning Multiphoton Microscopy
Laser scanning multiphoton microscopy yog ib qho kev txhim kho loj ntawm optical microscopy, tshwj xeeb tshaj yog rau kev soj ntsuam cov qauv sib sib zog nqus ntawm cov cell nyob, cov hlwb ruaj khov thiab cov ntaub so ntswg, thiab tuaj yeem tau txais cov txheej txheem ntau txheej Z-plane, uas yog, kho qhov muag, thiab tuaj yeem tsim kho. Peb-dimensional khoom qauv ntawm cov qauv. Lub confocal microscope siv lub teeb pom kev zoo laser, uas tau nthuav dav kom sau tag nrho lub dav hlau rear focal ntawm lub hom phiaj lens, thiab tom qab ntawd hloov mus rau hauv qhov chaw me me ntawm lub dav hlau focal ntawm cov qauv los ntawm lub lens system ntawm lub hom phiaj lens. Nyob ntawm tus lej aperture ntawm lub hom phiaj lens, txoj kab uas hla ntawm lub teeb pom kev zoo tshaj plaws yog li 0.25 ~ 0.8 μm, thiab qhov tob yog li ntawm 0.5 ~ 1.5 ua m. Qhov luaj li cas ntawm qhov chaw confocal nyob ntawm qhov tsim ntawm lub tshuab tsom iav, lub laser wavelength, cov yam ntxwv ntawm lub hom phiaj lens, lub xeev teeb tsa ntawm lub scanning chav tsev thiab qhov xwm ntawm cov qauv. Field microscopes muaj ntau yam teeb pom kev zoo thiab qhov tob ntawm qhov pom kev loj, thaum lub tshuab tsom iav confocal muaj teeb pom kev zoo uas yog tsom rau ntawm qhov chaw focal ntawm lub dav hlau focal. Qhov zoo tshaj plaws ntawm confocal microscopy yog tias nws tuaj yeem ua tau zoo kho qhov muag ntawm cov qauv fluorescent tuab (txog 50 μm lossis ntau dua), nrog lub thickness ntawm 0.5 txog 1.5 μm. Cov duab ntawm cov duab kho qhov muag tuaj yeem tau txais los ntawm kev txav cov qauv nce thiab nqis nrog lub tshuab ntsuas Z-axis stepper lub cev muaj zog. Kev nrhiav tau ntawm cov ntaub ntawv duab yog tswj nyob rau hauv lub dav hlau thiab yuav tsis cuam tshuam los ntawm cov teeb liab los ntawm lwm qhov chaw ntawm tus qauv. Tom qab tshem tawm cov nyhuv ntawm keeb kwm yav dhau fluorescence thiab ua kom lub teeb liab-rau-suab nrov piv, qhov sib piv thiab kev daws teeb meem ntawm cov duab confocal tau zoo dua qub piv nrog cov duab lumination fluorescence ib txwm muaj. Hauv ntau cov qauv, ntau cov qauv sib txawv ntawm cov khoom sib txuas ua ke los tsim cov txheej txheem nyuaj, tab sis ib zaug txaus cov khoom kho qhov muag tuaj yeem sau tau, peb tuaj yeem tsim kho lawv hauv 3D los ntawm software. Qhov kev sim no tau siv dav hauv kev tshawb fawb lom neeg los qhia txog cov txheej txheem nyuaj thiab kev ua haujlwm ntawm cov hlwb lossis cov ntaub so ntswg.
