Fluorescence microscope ntsig txog kev paub
Lub hauv paus ntsiab lus ntawm confocal fluorescence microscopy: lub teeb pom kev zoo yog siv los irradiate cov qauv, thiab lub teeb pom kev zoo me me yog tsim rau ntawm lub dav hlau focal. muaj cov splitters. Lub beam splitter xa cov fluorescence ncaj qha mus rau lub detector. Muaj ib tug pinhole nyob rau hauv pem hauv ntej ntawm lub teeb qhov chaw thiab lub detector, feem hu ua lub illumination pinhole thiab nrhiav pom pinhole. Qhov loj geometric ntawm ob yog tib yam, txog 100-200nm; txheeb ze rau lub teeb pom kev ntawm lub dav hlau focal, ob qho tib si yog conjugate, uas yog, lub teeb pom kev dhau los ntawm ntau lub lo ntsiab muag, thiab thaum kawg tuaj yeem tsom mus rau lub teeb pom kev zoo thiab qhov pom lub pinhole tib lub sijhawm. Nyob rau hauv txoj kev no, lub teeb los ntawm lub dav hlau focal tuaj yeem sib koom ua ke nyob rau hauv qhov ntsuas ntawm lub qhov nrhiav pom, thaum lub teeb tawg los ntawm saum toj lossis hauv qab ntawm lub dav hlau focal raug thaiv sab nraum lub qhov nrhiav pom thiab tsis tuaj yeem pom. Lub laser scans tus qauv taw tes los ntawm taw tes, thiab lub photomultiplier raj tom qab kuaj pom tus pinhole kuj tau txais cov duab confocal ntawm cov teeb pom kev sib raug zoo ntawm qhov taw tes, uas tau hloov mus rau hauv cov teeb liab digital thiab xa mus rau lub computer, thiab thaum kawg sib sau ua ke kom pom tseeb. confocal duab ntawm tag nrho cov dav hlau focal ntawm qhov screen.
Txhua daim duab focal dav hlau yog qhov ua tau ib qho kev kho qhov muag hla ntawm cov qauv, thiab qhov no optical cross-section yeej ib txwm muaj qee qhov tuab, tseem hu ua optical nyias seem. Txij li thaum lub teeb siv ntawm lub focal point yog ntau dua qhov uas tsis yog-focus point, thiab lub dav hlau uas tsis yog-focal teeb yog lim los ntawm lub pinhole, qhov tob ntawm teb ntawm confocal system yog kwv yees li xoom, thiab scanning raws Z. -axis tuaj yeem paub kho qhov muag tomography, ua rau Saib xyuas ob sab ntawm qhov muag pom ntawm qhov chaw tsom ntawm cov qauv. Ua ke XY dav hlau (focal dav hlau) scanning nrog Z-axis (optical axis) scanning, peb-dimensional duab ntawm cov qauv tuaj yeem tau txais los ntawm kev sib sau ob-seem dluab ntawm cov khaubncaws sab nraud povtseg thiab ua tiav los ntawm software tshwj xeeb hauv computer.
Ntawd yog, qhov nrhiav pom tus pinhole thiab lub teeb pom kev pinhole ib txwm tsom mus rau tib lub ntsiab lus, kom cov fluorescence zoo siab sab nraum lub dav hlau focal tsis tuaj yeem nkag mus rau hauv qhov ntsuas pom.
Lub ntsiab lus yooj yim ntawm kev ua haujlwm ntawm laser confocal yog tias nws siv lub teeb laser ua lub teeb ci. Raws li ib txwm muaj fluorescence microscope imaging, nws ntxiv ib lub laser scanning ntaus ntawv thiab ib tug conjugate focusing ntaus ntawv, thiab nws yog ib tug system rau cov duab tau txais thiab ua los ntawm lub computer tswj.
