Direct suav nrog lub tshuab tsom rau microbes
Kev sim txoj cai
Kev suav ncaj qha nyob rau hauv lub tshuab kuaj kab mob siv lub hemocytometer yog ib txoj hauv kev siv microbial suav. Qhov zoo ntawm txoj kev no yog tias nws yog intuitive thiab ceev. Muab cov tshuaj tua kab mob kom tsim nyog (lossis kev tshem tawm cov kab mob) rau hauv cov suav suav ntawm cov swb thiab lub hau npog iav ntawm hemocytometer, thiab suav hauv qab lub tshuab ntsuas. Txij li thaum lub ntim ntawm cov suav suav yog tsau (0.1mm2), nws tuaj yeem hloov mus rau tag nrho cov kab mob hauv ib chav tsev ntim raws li tus naj npawb ntawm cov kab mob tau pom nyob rau hauv lub tshuab tsom. Vim tias txoj kev no suav cov lej ntawm cov kab mob nyob thiab tuag, nws tseem hu ua tag nrho cov kab mob suav txoj kev.
Lub hemocytometer feem ntau yog ib qho tshwj xeeb iav swb uas plaub grooves tsim peb lub platform. Lub platform nyob rau hauv nruab nrab yog muab faib ua ob halves los ntawm ib tug luv luv kab rov tav zawj. Ib daim phiaj yog kos rau ntawm lub platform ntawm txhua sab. Txhua daim phiaj tau muab faib ua cuaj squares loj. Lub square loj nyob nruab nrab yog chav suav. Cov kab mob microorganisms raug suav hauv cov suav suav. Cov qauv ntawm cov ntshav suav lub rooj tsavxwm muaj nyob hauv daim duab Ⅷ-1.
Qhov ntsuas ntawm chav suav feem ntau muaj ob qhov tshwj xeeb, ib qho yog qhov loj square tau muab faib ua 16 nruab nrab squares, thiab txhua qhov nruab nrab squares muab faib ua 25 me me squares (Daim duab Ⅷ-2); Lwm qhov yog ib lub square loj Lub square muab faib ua 25 nruab nrab squares, thiab txhua qhov nruab nrab square muab faib ua 16 me me squares (Daim duab Ⅷ-1, C). Tab sis tsis muaj teeb meem dab tsi ntawm kev suav board nws yog, tus naj npawb ntawm cov squares me me nyob rau hauv txhua lub square loj yog tib yam, uas yog, 16 × 25=400 me squares, raws li qhia hauv daim duab Ⅷ-2.
Sab ntev ntawm txhua lub square loj yog 1 hli, thiab thaj tsam ntawm txhua lub square loj yog 1 mm2. Tom qab cov iav npog npog, qhov siab ntawm lub iav swb thiab lub hau iav yog 0.1 hli, yog li qhov ntim ntawm cov suav suav yog 0.1mm3.
Thaum suav, feem ntau suav tag nrho cov kab mob nyob rau hauv tsib lub squares nruab nrab, ces muab tus nqi nruab nrab ntawm txhua qhov nruab nrab square, thiab ces muab 16 los yog 25 kom tau tag nrho cov kab mob nyob rau hauv ib tug loj square, thiab ces hloov mus rau lub tag nrho cov kab mob hauv 1ml cov tshuaj tua kab mob.
Cov cuab yeej kuaj
Hemocytometer, microscope, coverlip, sterile capillary;
Cov khoom siv sim
Saccharomyces cerevisiae raug tshem tawm
Cov txheej txheem sim (microbial microscope direct suav method)
1. dilution
Ua kom raug tshem tawm Saccharomyces cerevisiae. Yog tias cov tshuaj tua kab mob tsis yog tuab, nws tsis tas yuav diluted.
2. Chav ntsuas microscopic
Ua ntej ntxiv cov qauv, ua ib qho kev soj ntsuam microscopic ntawm cov suav suav ntawm cov phaj suav. Yog tias muaj av, nws yuav tsum tau ntxuav ua ntej suav.
3. ntxiv cov qauv
Npog lub phaj huv thiab qhuav hemocytometer nrog lub hau npog iav, thiab tom qab ntawd siv lub qhov ncauj qhov ncauj tsis muaj menyuam kom tso me me ntawm cov kua dej Saccharomyces cerevisiae los ntawm ntug ntawm lub khob iav (tsis ntau dhau), kom cov kab mob tov. yog ze rau qhov sib txawv raws qhov sib txawv. Capillary osmosis nkag mus rau hauv lub suav chamber los ntawm nws tus kheej, thiab lub dav suav suav chamber tuaj yeem sau nrog cov kab mob ua kua. Ceev faj kom tsis txhob muaj cua npuas.
4. microscope suav
Tom qab so li 5 feeb, tso lub hemocytometer rau ntawm theem ntawm lub tshuab tsom, ua ntej siv lub tshuab hluav taws xob qis kom pom qhov chaw ntawm lub tshuab suav, thiab tom qab ntawd hloov mus rau lub hwj chim loj rau kev suav. Yog tias pom tias cov tshuaj tua kab mob yog tuab dhau los yog nyias dhau ua ntej suav, nws yuav tsum tau rov kho qhov dilution ua ntej suav. Feem ntau, cov qauv dilution xav tau txog 5-10 cov kab mob hauv txhua lub cell. Txhua chav suav xaiv cov kab mob hauv 5 daim phiaj nruab nrab (xaiv 4 lub ces kaum thiab hauv nruab nrab daim phiaj) rau suav. Cov kab mob ntawm kab sib chaws feem ntau tsuas yog suav rau ntawm kab sab sauv thiab sab xis. Nyob rau hauv cov ntaub ntawv ntawm cov poov xab budding, thaum qhov luaj li cas ntawm lub bud lub cev mus txog ib nrab ntawm cov niam cell, suav ob tug kab mob. Suav ib tus qauv los xam cov kab mob cov ntsiab lus ntawm cov qauv los ntawm cov nqi suav hauv ob chav suav.
5. Ntxuav lub Hemocytometer
Tom qab siv, yaug cov ntshav cov ntshav ntawm lub faucet nrog cov dav hlau dej, tsis txhob ntxuav nrog cov khoom tawv, thiab ziab nws ntawm koj tus kheej lossis nrog lub tshuab ziab plaub hau tom qab ntxuav. Kev tshuaj xyuas microscopic, saib seb puas muaj cov kab mob seem lossis lwm cov sediments hauv txhua lub cell. Yog tias nws tsis huv, nws yuav tsum tau ntxuav dua kom txog thaum nws huv.
